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全光譜流式細(xì)胞儀儀器的操作和使用流程

更新時間:2022-02-11      點(diǎn)擊次數(shù):1642
  全光譜流式細(xì)胞儀的調(diào)試和校準(zhǔn):
  在使用前,甚至在使用過程中都要精心進(jìn)行調(diào)試,以保證工作的可靠性和佳性。調(diào)試的項目主要是激光強(qiáng)度、液流速度和測量區(qū)的光路等。
  激光強(qiáng)度:除調(diào)整反射鏡的角度以調(diào)整到所需波長的激光出光外,還要結(jié)合顯示屏上的光譜曲線使激光的強(qiáng)度輸出為大。
  液流速度:可通過操作臺數(shù)字顯示監(jiān)督,調(diào)節(jié) 氣體壓力大小以獲得穩(wěn)定的液流速度。
  測量區(qū)光路調(diào)節(jié) :這是調(diào)試工作的關(guān)鍵。需要保證在測量區(qū)的液流、激光束、90散射測量光電系統(tǒng)垂直正交,而且交點(diǎn)較小。一般可在用標(biāo)準(zhǔn)熒光微球等校準(zhǔn)中完成。
  流式細(xì)胞術(shù)中所測得的量是相對值,因此需要在使用前或使用中對系統(tǒng)進(jìn)行校準(zhǔn)或標(biāo)定,這樣才能通過相對測量獲得的意義。
  因而FCM中的校準(zhǔn)具有雙重功能:儀器的準(zhǔn)直調(diào)整和定量標(biāo)度。標(biāo)準(zhǔn)樣品應(yīng)該穩(wěn)定,有形成份形狀應(yīng)是大小比較一致球形,樣品分散性能良好,且經(jīng)濟(jì)、容易獲得。

  全光譜流式細(xì)胞儀儀器的操作和使用流程:
  1、 打開電源,對系統(tǒng)進(jìn)行預(yù)熱;
  2、 打開氣體閾,調(diào)節(jié) 壓力,獲得適宜的液流速度;開啟光源冷卻系統(tǒng);
  3、 在樣品管中加入去離子水,沖洗液流的噴嘴系統(tǒng);
  4、 利用校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)樣品,調(diào)整儀器,使在激光功率、光電倍增管電壓、放大器電路增益調(diào)定的基礎(chǔ)上,0和90散射的熒光強(qiáng)度強(qiáng),并要求變異系數(shù)為小;
  5、 選定流速、測量細(xì)胞數(shù)、測量參數(shù)等,在同樣的工作條件下測量樣品和對照樣品;同時選擇計算機(jī)屏上數(shù)據(jù)的顯示方式,從而能直觀掌握測量進(jìn)程;
  6、 樣品測量完畢后,再用去離子水沖洗液流系統(tǒng);
  7、 因為實驗數(shù)據(jù)已存入計算機(jī)硬盤(有的機(jī)器還備有光盤系統(tǒng),存貯量更大),因此可關(guān)閉氣體、測量裝置,而單獨(dú)使用計算機(jī)進(jìn)行數(shù)據(jù)處理;
  8、將所需結(jié)果打印出來。
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